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产地 | 国产 |
品牌 | YLKbio |
货号 | YLK-U0178 |
保存条件 | -20℃避光保存,有效期见外包装 |
用途 | 科研&早期凋亡检测,Annexin V 偶联荧光蛋白 |
包装规格 | 5mg |
保质期 | 2年 |
是否进口 | 否 |
产品名称:预活化 APC 马来酰亚胺(Preactivated APC Maleimide)
产品规格:5mg
储存条件:-20℃避光保存,有效期见外包装
产品参数:
Ex/Em = 651/662 nm
分子量:~105 kDa
Extinction coefficient (cm-1 M-1):700000
产品介绍:
预活化APC马来酰亚胺(Preactivated APC Maleimide)是一种巯基反应染料,可与蛋白上游离的巯基反应。活化后的染料很容易和蛋白或抗体结合,且不改变APC的光谱特性。
使用方法:(以 IgG 为例) IgG 还原为了获得更好的标记效果,抗体溶液推荐 1 mg/mL,如果低于 1 mg/mL,则应浓缩抗体。抗体还原可以在磷酸盐缓冲液中进行。还原剂种类、浓度、孵育时间可参考相应文献。纯化后,需进行还原抗体浓度的测定。注:还原抗体不稳定, 纯化后立即进行偶联反应。
标记步骤:
1. 以预活化染料:还原抗体=0.7:1(质量比)的比例,将还原后的抗体添加到预活化的染料管中。注意:预活化 APC 染料 5 mg 规格需一次性使用完毕,即若抗体溶液浓度为 1 mg/mL,按照 0.7:1 的质量比,则需要 7143 μL 的抗体溶液加入到预活化染料中。
2. 室温(20-25℃)避光摇晃孵育 4 h。
3. 封闭抗体上游离的巯基,需参考文献资料。
4. 使用体积排阻色谱法纯化抗体/APC 偶联物溶液。注:如长期保存,需加抗体保存液,可稳定保存 6 个月。
注意事项:
1. 标记不同的抗体,所需染料与抗体的标记比例可能不同,当排除抗体质量、标记步骤等其他可能影响标记结果的因素后,可考虑降低抗体质量来达到较好的标记效果。
2. 荧光染料均存在淬灭,请注意避光,以减缓荧光淬灭。
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。