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产地 | 国产 |
品牌 | YLKbio |
货号 | YLK-U0118 |
用途 | 科研&定量双链DNA、NGS建库 |
包装规格 | 100T/500T |
是否进口 | 否 |
产品名称:Qbtest® X-Green II 双链 DNA 定量试剂盒升级款
产品规格:100T/500T
储存条件:4℃避光保存,有效期见外包装。长期保存可以储存在-20oC。
产品参数:Ex/Em: 480/520 nm(结合dsDNA)
产品介绍:
Qbtest® X-Green II 双链DNA定量试剂盒是荧光检测dsDNA并进行定量的一种产品,这种检测方法非常灵敏。常用于分子生物学中cDNA文库的构建、亚克隆DNA片段的纯化及应用,如进行DNA定量、产物扩增和引物的进一步检测。常规的DNA含量检测方法是在260 nm处测其吸光值。这种方法的主要缺点是核苷酸、单链核酸和蛋白质对信号的影响很大,并且还会受到核酸制备过程中污染物的干扰,无法区分DNA和RNA,而且灵敏度低(5 μg/mL dsDNA溶液A260 = 0.1)。Qbtest® X-Green II 双链DNA定量试剂盒检测方法简单方便,已成为生物制品残留DNA检测的标准。
Qbtest® X-Green II 只有与dsDNA结合后才发出荧光,并且荧光强度与DNA浓度成正比。Qbtest® X-Green II双链DNA定量试剂盒升级款检测浓度范围10 pg/μL - 100 ng/μL、检测质量范围0.2 – 100 ng,且线性关系较好(R2>0.99)。
该试剂盒可用于Qubit仪器,效能等同于Qbtest® dsDNA HS Assay Kits。
实验步骤:
1. 实验流程
2. 试剂制备 Qbtest® X-Green II 以浓缩液形式保存在有机溶剂中。实验时,配制工作溶液:1× Qbtest® X-Green II 工作液,将组分A 用组分B按1: 200的比例稀释,(如取1 μL组分A,加入199 μL组分B Buffer即为1× Qbtest® X-Green II工作液)。由于试剂容易吸附到玻璃表面,需在塑料容器中配制。Qbtest® X-Green II 试剂见光易降解,注意避光保存。
3. 实验方法(1)准备足够量的 0.5 mL 的可用于 Qubit 仪器的 Ep 管。注:Qubit 仪器适用 Ep 管为透明的薄壁 Ep 管,Ep 管的侧面不要做标记,以免影响荧光值采集。(2)制定标准曲线。准备两个Ep管,每管加入190 μL配置好的1× Qbtest® X-Green II 工作液,再分别向两个Ep管中加入10 μL组分C和组分D,涡旋震荡2-3 s,震荡过程中不要产生气泡。(3)干净的Ep管中加入一定体积的待测样本(1 - 20 μL),然后加入相应体积的检测工作液使得每个检测样品的终体积为 200 μL,涡旋2-3 s混匀。注:样本检测浓度/样本质量接近检测上下限,会出现复孔重复性差,定量不准确的结果,建议通过预实验将样本调整至合适范围进行检测。(4)室温避光孵育2 min。(5)按照 Qubit 荧光仪的操作说明,选择 dsDNA 高敏检测程序测定浓度。
注意事项:
1. 使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。
2. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
3. PicoGreen工作液 现配现用,以保证 结果。
4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。