产品名称：WonderBlue® High Sensitivity 双链DNA定量试剂盒

产品规格：200T/1000T

储存条件：4℃避光保存，有效期见外包装。

产品参数：Ex/Em：485/530 nm（结合dsDNA）

图1. 在dsDNA过饱和的条件下，WonderBlue®的激发与发射光谱图。

产品介绍：WonderBlue® High Sensitivity 双链DNA定量试剂盒不同于常规的基于吸光度的测量，这款试剂盒可以区分dsDNA、 ssDNA或RNA，有选择性地检测dsDNA（见图2）。与传统DNA定量方法相比，本产品具有检测范围广、高灵敏度、高特异性等优点。WonderBlue® High Sensitivity 双链DNA定量试剂盒可以在200 μL体系内定量0.2-100 ng的dsDNA（见图3）。此外，本产品还可以将其他污染物的影响降低至 ，可以耐受常规污染物例如蛋白质，盐，有机溶剂和洗涤剂等（见表1），且本产品不具有细胞膜通透性，没有细胞毒性和诱发突变性，对人体安全无害。

使用方法：

1. 为了得到 结果，请使用 校准的移液器和去 RNA 酶的枪头、试管以及检测板。建议检测时每个 DNA 标样和未知样品都设定 3 个复孔。如果检测时不只一块 96 孔板，建议每块 96 孔板都设定一条标准曲线，尽量减少检测板之间的误差。 

2. 使用前，将产品从储存条件下取出恢复至室温。如果 B 组分出现沉淀，可以 37℃水浴溶解。每个组分应充分震荡或涡旋混匀、离心，以免造成不必要的试剂的损耗。 

3. 每个待测样品对应 200 μL 的 WonderBlue 工作液。对于一个 96 孔板，吸取 200 μL B 组分，加入到 20 mL A 组分中，涡旋混匀，配置成 WonderBlue 工作液，为得到 结果，工作液应在一小时内使用完毕。如果将工作液重新储存并在 24 h 内使用，结果的准确性会有轻微损失。储存过程中，增强液可能会出现沉淀现象，可以通过涡旋震荡使其重悬。 

4. 对于每个样品，吸取 200 μL 的工作液至黑色的 96 孔板微孔中。为确保结果 可靠，建议每个测试样品和 DNA 标样分别做平行 3 个复孔，此过程也可以使用有 量程的多通道移液器进行。黑色的检测板可以减少各测试样品间的荧光干扰。 

5. 在 96 孔板微孔中，每孔加入 10 μL 的 dsDNA 标样或 1-20 μL 未知样品，并用移液器轻轻混匀。 

6. 将微孔板室温避光孵育 5-10 min，为得到 结果，孵育结束后，应立即读取检测板。也可以在 6 h 内读取数据，但结果的 性会有轻微损失。 

7. 使用激发波长和发射波长在 485 nm 和 530 nm 处的酶标仪测量荧光值。 

8. 制作一条标准曲线，计算检测样品的 DNA 浓度（见图 2）。注：图 3 标准曲线仅供参考，您可以根据实际测得的数据自制标准曲线，从而求算样品的浓度。

注意事项：

1. 使用前请将产品瞬时离心至管底，再进行后续实验。 

2. 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。 

3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。