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产地 | 国产/进口 |
品牌 | YLKbio |
货号 | YLK-U0091 |
用途 | 科研&高尔基体染色 |
包装规格 | 50T/100T |
是否进口 | 否 |
产品名称:高尔基体染色试剂盒(Green)
产品规格:50T/100T
储存条件:-20℃避光保存,有效期见外包装。
产品介绍:高尔基体是由囊泡和折叠膜组成的复合体,位于大多数真核细胞的细胞质中,参与分泌和胞内物质运输。NBD C6-神经酰胺是一种高尔基体绿色荧光探针,可用于活细胞中快速特异性荧光染色细胞高尔基体。
本品是牛血清白蛋白(BSA)和NBD C6-神经酰胺的复合物,常用于活细胞脂类运输和代谢的研究,相比较于传统的同类型探针,将NBD C6-神经酰胺与BSA反应形成复合物,其呈现出更高的摩尔吸光系数和光量子产量,且光稳定性更强,对活细胞高尔基体的标记更加高效。
本试剂盒内还提供了相应的稀释液,以及用于染色活细胞细胞核的染料Hoechst 33342。
实验步骤
一. NBD C6-神经酰胺探针工作液配置 1. 取少量A组分NBD C6-神经酰胺探针按照1:100的比例加入到B组分Staining Buffer中。例如取10 μL的A组分加入到0.99 mL 的B组分中,混匀后即为工作液。注:工作液中NBD C6-神经酰胺探针的浓度可以根据实际情况进行适当调整,推荐的稀释比例调整范围为1:50~1:200。
二. 活细胞高尔基体的荧光标记 1. 去除细胞培养液,用适量的溶液如 10 mM PBS 缓冲液洗涤 96 孔细胞板中或生长在盖玻片上的细胞。 2. 去除缓冲液,加入配制好的 NBD C6-神经酰胺探针工作液,与细胞 37℃共孵育 15~30 min。 3. 去除染料工作液,用 10 mM PBS 充分清洗细胞 2~3 次。 4. 可选:若需染色细胞核,则可将 C 组分 Hoechst 33342 按照 1:100 的比例与 NBD C6-神经酰胺探针工作液同时孵育细胞即可。5. 细胞清洗后,加入适量体积的 B 组分 Staining Buffer 孵育细胞,于 FITC 滤光片下观测结果。
注意事项:
1. 使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。
2. 荧光染料均存在淬灭问题,实验操作时请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
3. 本品可进行染色后固定步骤,但不支持透化。
4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。