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产地 | 国产/进口 |
品牌 | YLKbio |
货号 | YLK-U0076 |
用途 | 科研&神经荧光染料 |
包装规格 | 5 mg |
是否进口 | 否 |
产品名称:NerveGreenTM C4神经元荧光探针
产品规格:5 mg
储存条件:4℃避光保存,有效期见外包装。
产品参数:
外观:可溶于水的红色固体
Ex/Em:510/625 nm(MeOH)
Ex/Em:~480/600 nm(in membranes)
CAS 号:149838-22-2
分子式:C30H49Br2N3
分子量:611.5
产品介绍:神经末梢探针是一系列阳离子型苯乙烯基荧光染料,用于跟踪神经肌肉接头或突触的突触活动。这类染料通常具有亲脂性尾部(两个碳链)和带阳离子的高亲水性头部。NerveGreenTM系列探针是具有单个双键的染料。
阳离子苯乙烯基染料是通过活性依赖性染色突触小泡来发挥功能。染料与细胞或组织共孵育时,染料的水相部分没有荧光,而染料的亲脂性尾部插入细胞膜并呈现强荧光。神经刺激后,在进行胞吞作用时,染料被包裹在囊泡内,因此,洗去细胞表面附着的染料后,荧光信号强弱表示新形成的囊泡的数量的多少。反之,在胞吐作用时,染料与神经递质一起从囊泡释放,导致荧光信号减少。因此,荧光强度的变化反映了胞吞/胞吐或突触活动的情况。内吞过程中荧光增加的速率——“结合速率”和胞吐过程中荧光减少的速率 ——“解离速率”因染料种类而异。通常,具有较长亲脂性尾部和更多双键的染料对膜具有较高的亲和力,因此具有较高的结合速率和较低的解离速率。
本产品等同于 FM1-43,NerveGreenTM C4 是一种广泛使用的绿色荧光染料,通过染色突触的突触囊泡或神经肌肉接头来跟踪突触活动。结合使用红色荧光染料 NerveRedTM,突触和神经肌肉接头可以独立两个颜色成像。
实验步骤:
以下是盖玻片上培养的神经元细胞的神经末梢染色方案。用于特定实验的 方案需要由实验者摸索。神经末梢染料也可用于标记非神经元细胞类型的内吞囊泡。染色可以在 4℃进行以选择性标记质膜;在室温或 37℃ 下,染料的内吞通常在 10 min 内发生。可以使用台氏液或其它缓冲液,可选择性添加钠离子通道阻断剂河豚毒素(TTX),以阻断动作电位并防止染色后的突触囊泡释放。
1. 在 50 mM 台氏液中稀释神经末梢染料,至最终浓度为 4 μM。在室温下将含有细胞的盖玻片置于该溶液中 1 min,使细胞完全浸没。
2. 将盖玻片转移至台氏液 + 0.5 μM 河豚毒素(TTX)溶液中,室温下孵育 1 min。
3. 室温下,用台氏液 + 0.5 μM TTX 溶液反复多次洗涤盖玻片。荧光显微镜下拍照观察。
注意事项:
1. 荧光染料应尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。