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产地 | 国产 |
品牌 | YLKbio |
货号 | YLK-U0057 |
用途 | 科研&细胞膜染料 |
包装规格 | 10 mg |
是否进口 | 否 |
产品名称:DAPI(4',6-二脒基-2-苯基吲哚二盐酸盐)
产品规格:10 mg
储存条件:-20℃避光保存,有效期见外包装。
产品介绍:DAPI是一种可对DNA染色的细胞核染色试剂,它在嵌入双链DNA后释放蓝色荧光,亮度增强约20倍。DAPI常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI具有很高的光漂白承受水平,能用来检测酵母线粒体DNA、叶绿体DNA、病毒DNA以及染色体DNA等。在较低浓度(1 μg/mL)时,DAPI不可渗透于活细胞,但可用作固定细胞或组织部分的核染色剂。在较高浓度(10 μg/mL)时,DAPI可用于染色活细胞。
以贴壁细胞(96孔板)举例,每孔100 μL染色工作液,染色工作液浓度按5 μg/mL计算,10 mg配置为工作液大概可以用于20000个孔的染色。
产品参数:
外观:黄色粉末
Ex/Em(结合DNA)=360/460 nm
CAS号:28718-90-3
分子量:350.3
分子式:C16H17Cl2N5
分子结构图:
使用方法:
对于细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。如果要进行免疫荧光染色,染色完成后再进行 DAPI 染色。如果不需要进行其他染色,则直接进行后续的 DAPI 染色。
1. 用 ddH2O 将 DAPI 溶解,制得 1 mg/mL DAPI 水溶液,-20℃避光保存。注:DAPI 不能直接用 PBS 等缓冲溶液溶解,需要先用水将其溶解。
2. 取适量 DAPI 水溶液加到 PBS 中,制备成 5 μg/mL 的 DAPI 溶液。
3. 对于贴壁细胞(去除孔板中的培养基)或组织切片,加入少量 DAPI 染色液,覆盖住样品即可。对于悬浮细胞,至少加入待染色样品体积 3 倍的染色液,混匀。
4. 在室温培养细胞 10~20 min。
5. 用 PBS 或合适的缓冲液洗细胞两次,每次 3-5 min,洗涤完成后加入 50 μL PBS 防止细胞干掉。
6. 用带有 360 nm 激发波长,460 nm 发射波长的滤光片的荧光显微镜观察细胞。
注意事项
1. 使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。
2. 相较于染色细菌,DAPI染料对哺乳动物细胞染色更加灵敏,染色死活细菌时推荐在PBS或150 mM NaCl中溶解为终浓度10 μg/mL的染色液,室温染色30 min。通常对于死细胞的染色要比活细胞染色亮度高。
3. 用于细胞核染色时,推荐DAPI工作浓度为0.5-10 μg/mL。
4. DAPI对人体有害,请穿实验服并戴一次性手套操作,注意适当防护。
5. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓淬灭。