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产地 | 国产 |
品牌 | YLKbio |
货号 | YLK-U0060 |
用途 | 科研&细胞膜染料 |
包装规格 | 1 mg |
是否进口 | 否 |
产品名称:Ethidium Homodimer-I (溴乙啡锭二聚体I,EthD-I)
产品规格:1 mg
储存条件:4℃避光保存,有效期见外包装。
产品介绍:Ethidium Homodimer-I (EthD-I)是一种高亲和性的荧光核酸染料,与DNA或RNA结合后,可以使荧光增强30多倍。用于哺乳动物、细菌、酵母和真菌的染色。EthD-I带有较强正电荷,所以该染料不能穿过细胞膜进行活细胞染色,但是能穿过死细胞膜的无序区域而到达细胞核并且嵌入DNA双链从而产生红色荧光。因此EthD-I可以准确的检测溶液中的核酸或者解体细胞中的核酸,是一种较灵敏的核酸染色剂。
以贴壁细胞(盖玻片)举例,每个样本100 μL染色工作液,染色工作液浓度4 μM计算,1 mg配置为工作液大概可以用于2917个样本。
产品参数:
外观:可溶于DMSO和MeOH的红色固体
Ex/Em (结合DNA)= 528/617 nm
CAS号:61926-22-5
分子式:C46H50Cl4N8
分子量:856.8
分子结构图:
使用方法
注:该操作说明适用于大多数细胞,但不同的细胞类型、细胞密度、使用的培养基以及其他一些因素都有可能影响染色效果,本说明仅供参考。
1. 储存液的制备:取适量DMSO加入到EthD-I中,配制成2 mM储液,该储存液可于-20℃稳定保存一年。
2. 将20 μL 2 mM储液加入到10 mL无菌的组织培养级别的D-PBS中,充分涡旋混匀,使其终浓度为4 μM(推荐浓度为0.1-10 μM,不同细胞系建议梯度设置确定 染色浓度)。
3. 吸取上述配置好的工作液100-150 μL加入到细胞盖玻片上使其完全覆盖。孵育 是在含有盖子的盘子里防止染色液挥发。
4. 室温避光孵育30-45 min,若染色液浓度过高或温度过低可适当减少孵育时间。
5. 向一个新的显微镜载玻片上加入10 μL D-PBS。
6. 使用尖镊子小心且迅速将载有细胞的盖玻片倒置加在含有D-PBS的载玻片上,为了防止染色液挥发,用干净透明的指甲油封住载玻片四周。
7. 在荧光显微镜下观察细胞染色情况。
注意事项
1. 使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。
2. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。