产品名称：CytoMBriteTM 细胞膜红色荧光探针

产品规格：200 μL

储存条件：4℃避光保存，有效期见外包装。

产品介绍：CytoMBriteTM 细胞膜红色荧光探针（DiD）是一种亲脂性碳菁类染料，能够有效、稳定地标记质膜及细胞内膜结构。它具有细胞毒性低且不会在细胞间转移的特性，常被作为细胞融合、粘附、迁移的示踪分子，与PKH类染料相比，CytoMBrite染料使用方便、着色均匀。DiI（橙色荧光）、DiO（绿色荧光）、DiD（红色荧光）和其它细胞膜荧光染料如DiR（近红外荧光）、NIR680（远红外染料）配合使用，为多色成像和流式细胞分析提供了有效的工具。
CytoMBrite系列染料也可以用于甲醛固定后细胞的染色，同时兼容在染色后的甲醛固定步骤。此系列染料不适用于细菌或酵母。
以每次使用100 μL染色工作液计算，200 μL原液可以用400次。

产品参数：

Ex/Em (MeOH) = 644/663 nm
分子式：C67H103ClN2O3S
分子量：1052.1

使用方法:

工作液使用体积建议根据不同细胞系和实验体系来优化。建议从推荐量的 10 倍范围内开始 条件的摸索。 

1. 悬浮细胞染色（1）加入适当体积的培养基重悬细胞，使其密度为 1×106 /mL，再按 1:200 的比例加入染色原液。（2）37℃孵育细胞 2~20 min，不同的细胞 培养时间不同。可以 20 min 作为起始孵育时间，之后优化体系。（3）1000~1500 rpm 离心 5 min。倾倒上清液，再次缓慢加入 37℃预热的培养基重悬细胞。重复两次。 

2. 贴壁细胞染色（1）配制染色工作液：每 1 mL 培养基中加入 5 μL 的染色原液，涡旋混匀。（2）将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上，培养结束后移出盖玻片，吸走过量培养液，但表面要保持湿润。（3）在盖玻片的一角加入 100 μL 的染色工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。

（4）37℃孵育细胞 2~20 min，不同的细胞 培养时间不同。可以 20 min 作为起始孵育时间，之后优化体系以得到均一的标记效果。（5）吸干染料工作液，用培养液洗盖玻片 2~3 次，每次用预温的培养基覆盖所有细胞，孵育 5~10 min，然后吸干培养基。但要使表面保持湿润。 

3. 结果检测样品可在培养基中进行检测，可通过荧光显微镜成像或流式细胞仪分析。 

注意事项：
1. 使用前请将产品瞬时离心至管底，再进行后续实验。
2. DiA染色固定的细胞或组织样品时，通常使用配制在PBS中的4%多聚甲醛进行固定，使用其它不适当的固定液会导致荧光背景较高。
2. 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。