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产地 | 国产 |
品牌 | YLKbio |
货号 | YLK-U0041 |
用途 | 科研&活细胞染色、细胞成像、细胞增殖和功能、细胞示踪、细胞计数 |
包装规格 | 1 mg |
是否进口 | 否 |
产品名称:Calcein AM(钙黄绿素 AM)
产品规格:1 mg
储存条件:-20℃ 避光保存,有效期见外包装。
产品介绍:
Calcein AM 是一种对活细胞进行荧光标记的细胞染色试剂,它可以穿透细胞膜进入细胞,被细胞内的酯酶剪切形成 Calcein,从而被滞留在细胞内,发出强绿色荧光。与其它同类试剂(如 BCECF, AM 和 CFDA)相比,Calcein AM 的细胞毒性很低。Calcein 的激发和发射波长分别为 490 nm 和 515 nm。Calcein AM 仅对活细胞染色。可与 PI 联用,用于区别活细胞和死细胞。由于不同细胞系的 染色条件不同,我们建议根据实际情况确定 Calcein AM 的最适浓度。
产品参数
外观:可溶于DMSO 的灰白色固体
CAS号:148504-34-1
Ex/Em:494/517 nm (pH =8)
分子式:C46H46N2O23
分子量:994.9
分子结构图:
使用方法:
1. 用 DMSO 制备 1 mM 的 Calcein AM 溶液,并用 PBS 将其稀释制成 1~50 μM 的 Calcein AM 溶液。注:不同的细胞适用的Calcein AM浓度不同,2 μM的Calcein AM 适用的细胞有 NIH3T3、PtK2、HeLa、MDCK 等。
2. 染色 HeLa 等贴壁细胞时,先用 Trypsin-EDTA 等消化细胞,制备成细胞悬液。
3. 将细胞悬液离心 3 min (1000 rpm)。
4. 去除上清液,加入 PBS 缓冲液,细胞数量调整至 105 - 106 /mL,再用移液器充分混匀。注:由于培养基中的血清等含有酯酶,会分解 Calcein AM,导致空白背景数值上升,所以需要离心数次,用 PBS 洗涤数次直到完全洗净。
5. 在 200 μL 细胞悬液中加入 50 μL 稀释后的 Calcein AM 溶液,在 37℃下孵育 15 min。
6. 在盖玻片上滴加适量的染色的细胞溶液。用 490 nm 激发波长,515 nm 发射波长滤光片的荧光显微镜观察细胞。
注:如果 Calcein AM 很难进入细胞,可以使用表面活性剂处理,如 Pluronic F127。
注意事项:
1. Calcein AM 的酯键遇到湿气会分解,使用后请在-20℃下密闭冷冻保存,防止水分进入。
2. Calcein AM 储备液稀释后请及时使用,尽量现配现用。
3. 本产品仅供科研。