产品名称：NucGreen (2 mM in DMSO)

产品规格：1mL

储存条件：2~8℃避光保存，有效期见外包装

产品介绍：

NucGreen 是一种膜渗透性的 DNA 染料。染料优先与 dsDNA 结合并发出绿色荧光，这种染料很适合用来染色活细菌，对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都可进行染色。与 SYBR 系列染料不同，NucGreen 是非常稳定的，它可以在室温下进行常规的处理和储存，而不会被降解。用 NucGreen 染色的细菌可以通过荧光显微镜和流式细胞仪进行检测。

实验方法：

此实验步骤是针对在液体培养基里对细菌进行染色，其他条件的染色需要实验者根据文献资料等自行摸索 方案。 

1. 在最适培养基中，37℃过夜培养细菌至对数生长期。 

2. 取 1 mL 菌液，5000-10000 × g 离心 10-15 min 以收集菌体（若难以收集可适当增大转速或延长离心时间），再用 1 mL 0.85% 的 NaCl 重悬细胞。注：在 0.85% 的 NaCl 或 pH =7.5 的 10 mM Tris 中染色效果 ，在 PBS 或培养基中荧光信号较弱。 

3. 将 NucGreen 加入菌液中，使得染料终浓度为 25 μM。如有需要，可在此时同时加入其他染料，如死细菌染料 EthD-III。注：NucGreen 工作浓度需要根据不同的细菌类型进行调整，建议浓度范围为 5-50 μM。 

4. 在室温或 37℃下避光孵育 30 min。 

5. 5000-10000 × g 离心 10-15 min 以收集菌体，再加入适量 0.85% 的 NaCl 重悬细胞。 

6. 上机检测。对于荧光显微镜，可选择 FITC 滤光片进行检测；对于流式细胞仪，可选择 BL1/FL1 通道进行检测。

注意事项：

1.荧光染料存在淬灭性，请注意避光，以减缓荧光淬灭 

2.为了你的健康着想，在实验时请佩戴一次性手套和实验服

3.本产品仅供科研